Un diagnóstico fiable de la aspergilosis invasiva (AI) se ve obstaculizada por la dificultad en la obtención de muestras adecuadas de tejido. Para evaluar la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) de la PCR LightCycler para el diagnóstico de IA, 536 muestras de sangre fueron recolectadas durante un período de 22 meses a partir de 62 pacientes pediátricos (edad media 10 años , rango, 1-18) considerados en riesgo de IA. El antígeno galactomanano (GM) y ADN fúngico se evaluaron muestras de sangre en serie. IA se diagnosticó en ocho de los 62 pacientes (13%): probadas, cinco, probablemente, tres. La sensibilidad, especificidad, VPP y VPN de LightCycler PCR varía según el número de muestras positivas utilizadas para definir la positividad: 88%, 37%, 17% y el 95% de positividad sola muestra, y el 63%, 81%, 33% y el 94 % para la positividad de la muestra de serie respectivamente. La concordancia entre la positividad de la prueba de PCR LightCycler y el diagnóstico de IA fue del 79%. La positividad de la única LightCycler PCR mostró una buena sensibilidad para el diagnóstico de IA en pacientes pediátricos. El alto VPN hace LightCycler PCR una herramienta prometedora, además de pruebas de GM para diseñar una estrategia de ataques preventivos terapia antifúngica, aunque otros estudios de validación son necesarias.
Directrices para el uso de la reacción en cadena de polimerasa (PCR) a base de pruebas para ayudar en el diagnóstico de la aspergilosis invasiva (AI) en pacientes hematológicos de alto riesgo no se han formulado. Se evaluó prospectivamente a un ensayo de PCR anidada para la detección de Aspergillus en la sangre durante 95 episodios de neutropenia febril en pacientes con neoplasias hematológicas y el trasplante de células madre hematopoyéticas (HSCT). Resultados de la PCR se correlacionaron con la clasificación diagnóstica de la Organización Europea de 2002 para la Investigación y el Tratamiento del Cáncer / Grupo de Estudio de Micosis. Cuando dos resultados positivos se utilizaron para definir un episodio de "PCR positiva", la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo para la 'probada' / 'probable' IA (n = 13) fueron del 100%, el 75,4% , 46,4% y 100%, respectivamente. Consecutivos resultados positivos se produjeron en el 61,5% de estos 13 episodios. En general, positividad de la PCR precedida diagnóstico estándar en una media de 14 días y la mediana de tiempo entre los resultados positivos fue más corta que en otras categorías de IA. Todos los 13 episodios se produjeron en el marco de los receptores de HSCT alogénicos y leucemia aguda. Si la "elegibilidad" para el tratamiento antimicótico se basaron en dos-positivo-PCR, el uso de tratamiento empírico podría haberse reducido hasta en un 37%. El ensayo de PCR anidada es una prueba práctica para la exclusión de IA. Los pacientes con resultados positivos consecutivos o intermitentes resultados positivos dentro de los 14 (d) garantizar investigaciones inmediatas para la IA y la iniciación de la terapia antifúngica.
Introducción: La aspergilosis invasiva (AI) se asocia con alta mortalidad. Éxito con el tratamiento está relacionado con el diagnóstico precoz. La utilidad de los métodos clásicos de diagnóstico, sin embargo, es limitada. MÉTODOS: Para ayudar en el diagnóstico de la IA, se evaluaron retrospectivamente nuestro servicio de diagnóstico, usando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y sándwich de galactomanano ligado a enzimas (ELISA). RESULTADOS: Un total de 203 pacientes con riesgo de infección micótica invasiva fueron seleccionadas por PCR, y 116 de los pacientes también fueron probados por ELISA. El grupo de pacientes compuesto por 176 pacientes con neoplasia hematológica y 28 pacientes control con evidencia de infección por Candida invasora. Consenso de la Organización Europea para la Investigación y Tratamiento del Cáncer y los criterios del Grupo de Estudio de Micosis se utilizaron para clasificar la infección por hongos, que, por definición, excluido el resultado de la PCR. El método de PCR fue sensible (hasta el 92,3% de sensibilidad) y específica (hasta 94,6% de especificidad) y tenía un buen acuerdo con la prueba ELISA galactomanano (76,7%) y computarizada de alta resolución resultados en las tomografías. CONCLUSIONES: Un resultado negativo de PCR se puede utilizar para descartar IA y limitar la necesidad de la terapia antifúngica empírica, por lo que tiene un papel en el diagnóstico de las infecciones de IA, especialmente en combinación con las pruebas de antígeno. PCR-positivos los casos clasificados como "falsos positivos" con regularidad reflejan las limitaciones de los clásicos procedimientos microbiológicos o restricción del uso de métodos de consenso clínicos utilizados para clasificar la infección.
La quimioterapia siguiente neutropenia profunda y prolongada es un factor de riesgo para infección fúngica sistémica. A medida que el diagnóstico precoz de la infección fúngica invasiva (IFI) es difícil, estas infecciones siguen siendo asociados con una alta morbilidad y mortalidad. Recientemente, Pan-hongos reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha sido una ayuda prometedor en el diagnóstico rápido y precoz de las instituciones financieras internacionales. Durante los últimos años, un número creciente de sospecha de las instituciones financieras internacionales se han encontrado en nuestra institución en pacientes con neutropenia prolongada después de la quimioterapia inmunosupresora intensificado. El objetivo de este estudio fue investigar la utilidad de diagnóstico tanto del galactomanano de Aspergillus (GM) y la prueba de antígeno pan-hongos PCR en el diagnóstico de las IFI en alto riesgo los pacientes neutropénicos febriles pediátricos de cáncer. Durante el período de un año, 91 neutropénicos febriles (FN) de los casos pediátricos de alto riesgo para el desarrollo de las instituciones financieras internacionales, mientras que reciben quimioterapia se investigaron en el Instituto Nacional del Cáncer, Egipto. Estos pacientes fueron sometidos a evaluación clínica, tomografía computarizada del tórax, los cultivos convencionales de sangre para bacterias y hongos patógenos, la detección del antígeno de Aspergillus GM y el ensayo de PCR utilizando los cebadores pan-hongos. De los 91 episodios de NF, 15 fueron probadas las instituciones financieras internacionales, mientras que 27 casos eran probables (n = 13) o posible IFI (n = 14), y 49 era poco probable que los episodios de las IFI. Con base en resultados positivos para demostrada / probable IFIs, y en comparación con los resultados del cultivo, Pan-hongos PCR mostró una sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivos y negativos de 75%, 92%, 84% y 87%, respectivamente. Prueba de antígeno de Aspergillus mostró una sensibilidad del 79%, una especificidad del 61%, valores predictivos positivos y negativos de 54% y 83%, respectivamente. Un resultado negativo de la PCR en los casos probables y probadas estaba estrechamente relacionada con la terapia antifúngica previa de una historia previa de las instituciones financieras internacionales. En los pacientes con alto riesgo de las instituciones financieras internacionales, ni sensibilidad, ni la especificidad de la prueba de GM era suficiente. Los resultados del ensayo de PCR fue bastante específica, pero no muy sensible y tuve la oportunidad de pasar por alto el diagnóstico de las instituciones financieras internacionales. El ensayo de PCR parece ser una prueba prometedora para la definición objetiva de las instituciones financieras internacionales, pero no se recomienda como la única herramienta para el diagnóstico de las instituciones financieras internacionales. La combinación de microscopía, cultivo y PCR puede mejorar el resultado de diagnóstico.
ANTECEDENTES: Los métodos actuales de laboratorio y radiológicos para el diagnóstico de la aspergilosis invasiva (AI) la falta de sensibilidad y especificidad. MÉTODOS: Se evaluó prospectivamente el valor diagnóstico de dos veces por semana de cribado para la circulación de Aspergillus fumigatus y A. flavus ADN con una cadena de la polimerasa reacción enzima-inmunoensayo (ELISA-PCR). RESULTADOS: Entre los 201 pacientes adultos con neoplasias hematológicas que fueron incluidos en el estudio, 55 casos fueron diagnosticados IA. Sobre la base del análisis de 1205 muestras de suero de 167 pacientes, la sensibilidad, especificidad y valores predictivos positivo y negativo de la PCR-ELISA para los casos de IA probadas y probables eran el 63,6%, 89,7%, 63,6% y 89,7%, respectivamente, cuando las muestras con 2 resultados positivos consecutivos se utilizaron. El uso de una combinación de la PCR-ELISA y un ensayo de galactomanano (GM) aumentó la sensibilidad a 83,3%, aumentó el valor predictivo negativo a 97,6%, y la disminución de la especificidad de 69,8%. En la mayoría de los pacientes con IA, ELISA-PCR positividad previsto o fue simultánea con el inicio de la terapia antifúngica, las anomalías encontradas por la tomografía computarizada, el diagnóstico micológico / histológico, y la positividad de GM. En general, el 56,3% de los pacientes tuvieron al menos una muestra positiva, y el falso positivo de una sola tasa fue de 44,8%. CONCLUSIONES: Además de la detección de serie para GM antigenemia y la vigilancia radiológica, ELISA-PCR puede mejorar las tasas de diagnóstico precoz de la IA y el manejo de pacientes con neoplasias hematológicas.
Un estudio prospectivo ciego se llevó a cabo para determinar si el cribado de la sangre total con un tiempo real, la reacción en cadena de polimerasa panfungal (PCR) puede predecir el desarrollo de la infección fúngica invasiva (IFI) en inmunocomprometidos pacientes hemato-oncología. En total, 78 pacientes (125 episodios de tratamiento) fueron examinados dos veces por semana en tiempo real utilizando la tecnología de PCR panfungal LightCyclertrade marca. FII se documentó en 19 episodios de tratamiento (cinco probable probada, tres y posible 11), y en 12, la PCR fue secuencialmente positivo. Positividad de la PCR se produjo en: 4/5 probada; 02.03 probable, 6/11 es posible, y 29 106 / sin las IFI. En 8/12 con las instituciones financieras internacionales y los resultados de PCR positivos de forma secuencial, se produjo antes de positividad de la PCR (mediana de 19,5 días) y en 4/12 (mediana de 10,5 días) después del inicio de la terapia antifúngica empírica. Con base en resultados positivos para secuenciales demostrada / probable IFIs la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo fue de 75, 70, 15 y 98%, respectivamente. En tiempo real panfungal PCR es una herramienta sensible para el diagnóstico precoz de las IFI en inmunocomprometidos pacientes hemato-oncología. Puede ser más útil como método de cribado en pacientes de alto riesgo, ya sea para dirigir temprana preventiva terapia antifúngica o para determinar si la terapia antifúngica empírica puede ser retenido en los pacientes con antibióticos - resistente a la neutropenia febril. Sin embargo, estas estrategias requieren una evaluación adicional en ensayos clínicos comparativos.
OBJETIVO: Comparar la PCR con la detección del antígeno galactomanano para el diagnóstico de la aspergilosis invasiva (AI). Métodos: Se recogieron muestras seriadas de sangre de pacientes hematológicos con riesgo de IA, y se analizaron las muestras retrospectivamente para galactomanano (GM) con la prueba de antígeno de Platelia y por Aspergillus ADN utilizando un in-house de PCR-ELISA. Análisis combinado de GM y la PCR se realizó en 263 muestras de 25 pacientes. Los pacientes se clasificaron para la IA potencial de acuerdo con los criterios de consenso internacional, con cinco pacientes clasificados como positivos (cuatro probada, una probable) y 20 clasificados como negativos (siete posibles, 13 no hay evidencia de IA). RESULTADOS: Los cinco pacientes con IA fueron positivos por PCR con resultados positivos en 24 de 82 muestras, mientras que tres de los cinco pacientes fueron positivos por GM con cuatro de las 82 muestras positivas. Tres de los 20 pacientes sin IA fueron positivos por PCR en 18 de 181 muestras, mientras que los resultados correspondientes para la detección de GM fue uno de 20 y uno de 181, respectivamente. Ajuste de ELISA valores de corte y / o mediante la exigencia de dos muestras consecutivas que se generan resultados positivos diferentes, sin embargo, la reducción del índice de positividad (IP) para la detección de GM a 0,5 no mejoró la sensibilidad del ensayo. Los resultados óptimos para la detección de la PCR y GM fueron: 100% y el 60% de sensibilidad, 85% y una especificidad del 95%, 0,625 y 0,75 el valor predictivo positivo, y 1,0 y 0,8 el valor predictivo negativo, con una frecuencia de muestreo de falsos positivos, de 8 y 0,4% , razón de probabilidad positiva de 6,66, y 11,99 y razón de probabilidad negativa de 0 y 0,42, respectivamente. CONCLUSIONES: Este método PCR es muy sensible para el diagnóstico de la IA, pero se asocia con una tasa moderada de los falsos positivos, el ensayo de GM mostraron baja sensibilidad pero alta especificidad. La evaluación adicional de los ensayos de PCR para el diagnóstico de IA y otras infecciones fúngicas invasivas se justifica.
El establecimiento de un método óptimo no invasivo para el diagnóstico de la aspergilosis invasiva (AI) es necesario para mejorar el manejo de esta infección potencialmente mortal en pacientes con trastornos hematológicos, y una serie de pruebas no invasivas para la IA que se dirigen a los distintos componentes de hongos, incluyendo galactomanano , (1 -> 3)-beta-D-glucano (GDB), y el ADN de Aspergillus, se han desarrollado. En este estudio, se evaluó prospectivamente la capacidad diagnóstica de tres pruebas no invasivas para la IA que se utilizaron en una estrategia de cribado semanal: el sándwich de doble ligado a enzimas (ELISA) para el galactomanano (Platelia Aspergillus), un ensayo de PCR en tiempo real para Aspergillus ADN (GeniQ-Asper), y un ensayo para la BDG (beta-glucano Wako). Se analizaron 149 episodios consecutivos de tratamiento en 96 pacientes con trastornos hematológicos que se encontraban en alto riesgo de IA y diagnosticado 9 casos probados IA, 2 casos probables, IA y 13 posibles infecciones invasivas fugados. En un receptor de funcionamiento característico (ROC), el área bajo la curva ROC fue el más grande de ELISA, con dos resultados positivos consecutivos (0,97, p = 0,036 para la prueba ELISA en comparación con la PCR, P = 0,055 para la prueba ELISA en comparación con BDG). Sobre la base de la curva ROC, el punto de corte para el ELISA podría reducirse a un índice de densidad óptica (ODI) de 0,6. Con el uso de este punto de corte para ELISA y puntos de corte para PCR y BDG que le dan un nivel de especificidad, la sensibilidad / especificidad / valor predictivo positivo / negativo valor predictivo de la prueba ELISA y PCR y pruebas de BDG se 1.00/0.93/0.55 / 1,00, 0.55/0.93/0.40/0.96, y 0.55/0.93/0.40/0.96, respectivamente. En conclusión, entre estas pruebas de detección semanales para IA, el sándwich de doble prueba de ELISA fue la más sensible para predecir el diagnóstico de la IA en pacientes de alto riesgo con enfermedades hematológicas, con un límite reducido de 0,6 ODI
La aspergilosis invasora (AI) es un problema considerable clínica en pacientes neutropénicos con neoplasias hematológicas, aunque el diagnóstico sigue siendo difícil. Se evaluó prospectivamente a una reacción en cadena de la polimerasa LightCycler (PCR), un ensayo de PCR anidada y un galactomanano (GM), ligado a enzimas (ELISA) para validar su importancia en el diagnóstico de IA. Durante 205 episodios de tratamiento en 165 pacientes de seis centros, un ensayo de PCR anidada y de pruebas de GM se llevó a cabo a intervalos regulares. Positivos resultados de la PCR anidada se cuantificó mediante un ensayo de PCR LightCycler. Episodios de los pacientes fueron estratificados de acuerdo a la Organización Europea de 2002 para la Investigación y Tratamiento del Cáncer de criterios / Micosis estudio de consenso del grupo y los resultados de la PCR y serología fueron correlacionados con la clasificación de diagnóstico clínico. Las tasas de sensibilidad y especificidad para el ensayo de PCR anidada fueron hasta el 63,6% [95% intervalo de confianza (IC): 30,8-89%) y el 63,5% (IC 95%: 53,4-72,7%), respectivamente, y el 33,3% y 98,9% (95% CI: 7.5-70.1% y 94.2-99.9%) de GM, respectivamente. El ensayo de PCR LightCycler dado resultados positivos en el 21,4%, sin discriminación por parte de la cuantificación a través de las categorías clínicas diferentes. En esta comparación prospectiva, la PCR fue superior a la de GM con respecto a las tasas de sensibilidad. En los pacientes con alto riesgo de IA, los resultados positivos para Aspergillus por PCR de muestras de sangre son muy sugerentes para la IA y contribuir al diagnóstico.
Se evaluó el valor de Aspergillus PCR como herramienta para el diagnóstico de la aspergilosis invasiva de muestras de sangre entera durante la terapia antifúngica. En un estudio de 3 años, 36 pacientes que recibieron la terapia antifúngica, debido a los resultados de la radiografía de tórax muy sugerentes de la neumonía fúngica se evaluaron. Los resultados de la PCR de muestras de sangre entera se compararon con los obtenidos de los líquidos de lavado broncoalveolar y / o muestras de tejido. Un total de 205 muestras de sangre entera, 15 aspiraciones con aguja fina o biopsia muestras de tejido, y 21 líquidos de lavado broncoalveolar y secreciones traqueales fueron analizados mediante PCR. De los 36 pacientes, 15 habían demostrado, 9 tenían probable, y 12 tenían una posible infección invasiva por Aspergillus según la Organización Europea para la Investigación y Tratamiento del Cáncer / fungoide definiciones de Grupos de Estudio. Para los pacientes con infección demostrada los valores de sensibilidad de la PCR en muestras de pulmón y la sangre fueron de 100 y 40%, respectivamente. El valor predictivo negativo de la vigilancia en la sangre bajo condiciones de tratamiento antifúngico fue del 44%. Liquidación de ADN del hongo de la sangre se asoció con la resolución de los síntomas clínicos en seis de los nueve pacientes con infección demostrada. Repetidos resultados positivos de PCR para Aspergillus se asociaron con desenlace fatal, ya que tres de los seis pacientes murieron. Para los pacientes con infección probable de los valores de sensibilidad de la PCR en el líquido de los pulmones y la sangre eran 66 y 44%, respectivamente. El beneficio de diagnóstico por PCR utilizando muestras de sangre entera se limita cuando el muestreo se lleva a cabo después del tratamiento se ha iniciado. Rendimiento de Aspergillus PCR utilizando muestras de tejido se recomienda, además de un examen microscópico y la técnica de cultivo para la detección sensible de infección por hongos.
Un diagnóstico fiable de la aspergilosis invasiva (AI) se ve obstaculizada por la dificultad en la obtención de muestras adecuadas de tejido. Para evaluar la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) de la PCR LightCycler para el diagnóstico de IA, 536 muestras de sangre fueron recolectadas durante un período de 22 meses a partir de 62 pacientes pediátricos (edad media 10 años , rango, 1-18) considerados en riesgo de IA. El antígeno galactomanano (GM) y ADN fúngico se evaluaron muestras de sangre en serie. IA se diagnosticó en ocho de los 62 pacientes (13%): probadas, cinco, probablemente, tres. La sensibilidad, especificidad, VPP y VPN de LightCycler PCR varía según el número de muestras positivas utilizadas para definir la positividad: 88%, 37%, 17% y el 95% de positividad sola muestra, y el 63%, 81%, 33% y el 94 % para la positividad de la muestra de serie respectivamente. La concordancia entre la positividad de la prueba de PCR LightCycler y el diagnóstico de IA fue del 79%. La positividad de la única LightCycler PCR mostró una buena sensibilidad para el diagnóstico de IA en pacientes pediátricos. El alto VPN hace LightCycler PCR una herramienta prometedora, además de pruebas de GM para diseñar una estrategia de ataques preventivos terapia antifúngica, aunque otros estudios de validación son necesarias.
